Product Articles

Life Science

Apoptosis Induction using AttuneTM NxT Flow Cytometer

การศึกษาการตายของเซลล์โดยผ่าน Apoptosis pathway เป็นอีกหนึ่งวิธีที่ใช้ประเมินประสิทธิภาพของยาหรือสารสกัด เป็นหนึ่งขั้นตอนสำคัญในการศึกษาด้าน Cancer research และการพัฒนายารักษาโรคมะเร็ง การศึกษาดังกล่าวนิยมใช้เทคนิค Flow cytometry เข้ามาช่วยในการวิเคราะห์ เพื่อให้ได้ผลการทดลองที่แม่นยำมากยิ่งขึ้น

 

ในงานด้าน cancer research เรามักจะเห็นการศึกษาความสัมพันธ์ระหว่างปริมาณสารและการตอบสนองของเซลล์ต่อสารหรือยา ซึ่งเป็นวิธีมาตรฐานที่ใช้ศึกษาประสิทธิภาพของยานั้นๆ ในที่นี้จะยกตัวอย่างเกี่ยวกับงานวิจัยที่ศึกษาประสิทธิภาพของยาต้านมะเร็งต่อ Jurkat cells โดยใช้เทคนิค Flow cytometry ซึ่ง Jurkat cells เป็น human T lymphocyte มักถูกใช้เป็นแบบจำลองสำหรับศึกษา acute T cell leukemia โดยจะศึกษาฤทธิ์ของยาต้านมะเร็งทั้งหมด 4ชนิด ได้แก่ staurosporine, camptothecin, cycloheximide และ etoposide ในงานวิจัยดังกล่าวเป็นการวัดค่าของเอนไซม์ caspase-3 และ caspase-7ซึ่งเป็นเอนไซม์ที่ถูกผลิตออกมาในขั้นตอนการเกิด Apoptosis โดยใช้ Invitrogen™ CellEvent™ Caspase-3/7 Green Detection Reagent และวิเคราะห์ด้วยเครื่อง AttuneTM NxT Flow Cytometer

ตาราง 1 แสดงรูปแบบของ 96-well plate ที่ใช้ในการทดสอบฤทธิ์ของยาต้านมะเร็ง 4 ชนิดที่ความเข้มข้นแตกต่างกันต่อเซลล์เพาะเลี้ยงชนิด Jurkat

เมื่อวิเคราะห์ด้วย Invitrogen™ Attune™ NxT Software โดยตั้งค่า gating ของ Histogram peak เป็น positive และ negative peak พบว่า ยา staurosporine สามารถชักนำให้เกิดการตายแบบ Apoptosis เมื่อใช้ความเข้มข้นสูง(รูปที่ 1A) ในขณะที่ความเข้มข้นต่ำเป็นพิษต่อเซลล์น้อยที่สุดต่อ Jurkat cells (รูปที่ 1B)

รูปที่ 1 แสดงฮิสโตแกรมของค่าเอนไซม์ caspase-3 และ caspase-7 ในเซลล์ Jurkat ที่ทดสอบด้วยยา staurosporine ที่ความเข้มข้น 10 µM (A) และ 2 nM (B) และฮีทแม็พสำหรับใช้เพื่ออ่านค่าในรูปแบบของ 96-well plate (C)

ในการทดสอบแบบ screening เช่นนี้ นอกจากการเลือกน้ำยา สีย้อม หรือ แอนติบอดี ที่เกี่ยวข้องกับ Apoptosis pathway เพื่อให้ได้มาซึ่งผลการทดลองที่ตรงตามวัตถุประสงค์ ซึ่ง Invitrogen™ ได้ผลิตน้ำยาออกมาอย่างหลากหลาย ตอบโจทย์ทุกฟังก์ชันและสามารถเลือกใช้ได้ตรงตามเลเซอร์ของเครื่องแล้วนั้น การเลือกเครื่อง Flow cytometer ที่อำนวยความสะดวกในการวิเคราะห์เป็นสิ่งสำคัญที่จะทำให้นักวิจัยสามารถทำงานได้ง่าย รวดเร็ว และได้ข้อมูลที่แม่นยำ

Invitrogen™ ภายใต้บริษัท Thermo Fisher Scientific ได้ออกแบบเครื่อง Flow cytometer ที่มีชื่อว่า “AttuneTM NxT Flow Cytometer” ที่มาพร้อมกับคุณสมบัติที่โดดเด่นมากกว่า Flow cytometer ที่คุณเคยรู้จัก

  • มีประสิทธิภาพสูง : สามารถวิเคราะห์ผลได้รวดเร็วมากกว่า traditional flow cytometer ถึง 10 เท่า
  • มีความยืดหยุ่นสูง : สามารถติดตั้งได้สูงสุด 4 เลเซอร์ โดยสามารถติดตั้งเลเซอร์เพิ่มเติมได้ในภายหลัง และสามารถวัดค่าสัญญาณฟลูออเรสเซนส์ได้สูงสุด 14 สี, 16 พารามิเตอร์
  • ล้ำสมัย : ใช้เทคโนโลยีใหม่ที่เรียกว่า “Acoustic-assisted hydrodynamic focusing” ช่วยให้ได้ข้อมูลที่มีความแม่นยำสูง และลดการอุดตันของตัวอย่าง

สนใจดูข้อมูลเพิ่มเติมได้

https://www.thermofisher.com/th/en/home/life-science/cell-analysis/flow-cytometry/flow-cytometers/attune-acoustic-focusing-flow-cytometer.html หรือติดต่อแผนก Technical support

e-mail: TAS@3nholding.com หรือฝ่ายงาน Life Science product โทร 022748331


X