PrestoBlue

PrestoBlue™ Cell Viability Reagent
Get high-quality result in 10 minutes!


Alternative product of MTT and XTT!


    วิธีที่ใช้ตรวจสอบการเจริญของเซลล์ หรือความมีชีวิตอยู่ของเซลล์ สามารถวัดได้จาก Mitochondrial function ด้วยวิธี MTT และ XTT ซึ่งวิธีเหล่านี้ต้องใช้ระยะเวลานานในการบ่มสารกับเซลล์ (ตารางที่ 1) และความยุ่งยากในขั้นตอนการทำ คือต้องมีขั้นตอนในการละลายสารที่ตกตะกอนอยู่ในเซลล์ด้วย DMSO ทำให้การวัดถูกจำกัดเป็นแบบ End point assay เท่านั้น ดังนั้นในปัจจุบันได้มีการพัฒนา PrestoBlue™ reagent เพื่อนำมาใช้ในการวัดปริมาณของเซลล์

PrestoBlue™ คืออะไร?

    PrestoBlue™ เป็น resazurin-based compound ที่สามารถผ่านเข้าสู่เซลล์ได้ (Cell-permeant) โดยไม่มีความเป็นพิษต่อเซลล์ ทำให้ PrestoBlue™ สามารถวัดแบบ kinetic assay ได้ เมื่อสารเข้าสู่เซลล์แล้วพบกับสภาวะ reducing environment สารจะถูก reduced จากสีม่วงไปเป็นสีแดง ดังนั้นความเข้มของสีแดงจะเพิ่มขึ้นเมื่อมีสภาวะ reducing ภายในเซลล์ที่ยังมีชีวิตเพิ่มขึ้นด้วย สารมีความไวต่อสภาวะ reducing ภายในเซลล์มาก (high-sensitivity) ดังนั้นทำให้ขั้นตอนในการบ่มสารกับเซลล์ใช้ระยะเวลาเพียง 10 นาทีเท่านั้น (ตารางที่ 1) ซึ่งประหยัดเวลามากเมื่อเทียบกับ MTT และ XTT assay 



ตารางที่ 1 แสดงการเปรียบเทียบระยะเวลาของการบ่มสารกับเซลล์ของ MTT, XTT, และ PrestoBlue™

วิธีการใช้ PrestoBlue™
   
    สารละลาย PrestoBlue™ จะมีความเข้มข้น 10x เมื่อนำมาใช้จะถูกเจือจางให้เป็นความเข้มข้น 1X ในการทดลองเมื่อทำการใส่สารทดสอบ (test compound) ที่สนใจ กับเซลล์แล้ว สามารถหยด PrestoBlue™ แล้วบ่มไว้เป็นระยะเวลา 10 นาที (รูปที่1) แล้วทำการวัด Fluorescent intensity หรือ Absorbance ได้ (ตารางที่ 2)


รูปที่ 1. แสดงวิธีในการใช้ PrestoBlue™ วัดปริมาณความเป็นพิษกับเซลล์ หรือปริมาณเซลล์ที่ยังมีชีวิต


ตารางที่ 2. แสดงความยาวคลื่นที่ใช้วัดค่า Fluorescence intensity และ ค่า Absorbance ของ PrestoBlue™

ข้อดีของ PrestoBlue™

-    ประหยัดเวลาในการทดลอง เนื่องจากใช้ระยะเวลาในการบ่มเพียง 10 นาที
-    ไม่เป็นพิษกับเซลล์ ดังนั้นสามารถวัดแบบ kinetic assay และสามารถนำเซลล์ที่วัดแล้วไปทำการทดลองต่อได้
-    PrestoBlue™ มีความไวในการทดสอบ สามารถวัดเซลล์ปริมาณน้อยได้ (กราฟที่ 2)
-    เป็นสารละลายความเข้มข้น 10x ซึ่งพร้อมใช้ได้เลย ไม่ต้องมีการนำมาละลายด้วยตัวทำละลายอื่น
-    สามารถใช้ได้ทำ adherent และ suspension cell ได้สะดวกและรวดเร็ว
-    ไม่ต้องทำการดูดอาหารออกจาก plate เหมือนกับ MTT assay ที่ต้องดูดออกแล้วใส่ DMSO เพื่อละลายสี formazan ในเซลล์
 

กราฟที่ 1. แสดงการเปรียบเทียบความไวของ PrestoBlue™, CellTiter Blue®, และ alarmarBlue® เมื่อทำการบ่มเซลล์กับสารเป็นระยะเวลา 10 นาที


กราฟที่ 2. แสดงความไวของ PrestoBlue™ ที่สามารถวัดปริมาณเซลล์น้อยและยังคงให้ค่าที่มีความน่าเชื่อถือ (linearity) อยู่

Link to PrestoBlue™ promotion Half price! :
http://www.gibthai.com/pro/promotion.php
More information:
www.invitrogen.com  
www.antalyaescort.web.tr

 

Copyrights © 2015 & Gibthai Co., Ltd. All Rights Reserved