ตอบ: siRNA ย่อมาจาก small interfering RNAs ซึ่งเป็นอาร์เอ็นเอสายคู่ ที่ทำหน้าที่ตัด RNA ที่มีอยู่ในเซลล์ เพื่อไม่ให้เกิดการแสดงออกของยีน โดยการนำเข้าเซลล์ด้วยวิธีการ transfection ซึ่งการทำงานแบบนี้เรียกอีกอย่างว่า RNA interference (RNAi) อ่านรายละเอียดเพิ่มเติมได้ที่ www.gibthai.com หัวข้อ technical note เรื่อง Block it RNAi technologies

ตอบ: ได้คะ โดยนำโมเลกุล RNAi และพลาสมิดดีเอ็นเอที่ต้องการเข้าเซลล์ด้วย lipofectamine 2000

ตอบ: แนะนำให้ละลาย single strand RNA oligo ด้วย 1xTE buffer (10mM Tris HCl, pH 8.0, 0.1 mM EDTA) หรือจะใช้ RNase free water ก็ได้ ส่วน Duplex RNA (siRNA) ละลายด้วยน้ำได้เลยคะ เนื่องจาก RNA มาในรูปแบบ lyophilized ที่อยู่ในบัฟเฟอร์อยู่แล้ว

ตอบ: หากเก็บ RNAi oligos ไว้ที่อุณหภูมิ -20oC จะสามารถเก็บได้นานถึง 6 เดือนคะ

ตอบ: บริษัท Invitrogen สามารถ modified สาร phosphate, biotin และ fluorescein ที่ปลาย 5’ end ของเส้น RNAi ได้คะ

ตอบ: 50 เบส

ตอบ: โดยปกติแล้วการจะวัดประสิทธิภาพหรือการ knockdown ของยีนได้นั้น สามารถทำได้ 2 แบบคือ วัดระดับแปลรหัส (transcription) เพื่อดู mRNA level ว่ามีการลดลงหรือไม่โดยการทำ real-time PCR หรือวัดในระดับการถอดรหัส (translation) เพื่อดูการแสดงออกของโปรตีน โดยการทำ western blot

ตอบ: ในการสังเคราะห์ RNAi oligos นั้นจะติดตามผลด้วย Trityl analysis และสุดท้ายจะทดสอบด้วยเครื่อง mass spectroscopy คะ