Cell Dissociation Reagents หรือสารที่ทำให้เซลล์ยึดเกาะหลุดออกจากภาชนะที่เพาะเลี้ยงอยู่ โดยอาศัยการย่อยโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการยึดเกาะของเซลล์บริเวณผิวเซลล์ โดยทั่วไปนักวิจัยอาจจะคุ้นเคยกับเอนไซม์ที่ทำหน้าที่เป็น Cell Dissociation Reagents ในชื่อของ GibcoTM trypsin solution ซึ่งเป็นเอนไซม์ trypsin ที่ผลิตมาจากตับอ่อน (pancreas) ของสัตว์ เนื่องจากประสิทธิภาพในการย่อยที่ดีจึงทำให้ trypsin เป็นที่รู้จักและใช้ในงาน Cell culture กันอย่างกว้างขวาง อย่างไรก็ตามยังคงมี Cell Dissociation Reagents ที่ทำหน้าที่ได้เหมือน trypsin แต่มีความอ่อนโยนกับเซลล์มากกว่า นั่นก็คือ Gibco™ TrypLE

Gibco™ TrypLE เป็นเอนไซม์ trypsin ที่ผ่านการสังเคราะห์ หรือเรียกว่า recombinant cell-dissociation enzyme ที่ผลิตออกมาให้สามารถใช้งานทดแทนผลิตภัณฑ์ในกลุ่ม trypsin ได้โดยตรง โดยที่มีคุณสมบัติ ดังนี้

• มีความอ่อนโยนกับเซลล์มากขึ้น ทำให้เหมาะอย่างยิ่งกับงานที่ต้องการนำเซลล์ไปศึกษาการแสดงออกของโปรตีนที่อยู่บริเวณผิวเซลล์ (cell surface proteins)

รูปที่ 1 แสดงผลการทดลองจากการศึกษาการแสดงออกของ cell surface marker ชนิด CD2 ในเซลล์ Jurkat เมื่อใช้0.05% trypsin (A) และ TrypLE Express reagent (B)โดยใช้เวลาในการบ่มที่ 0, 5, 10 และ 20 นาที จากกราฟฮิสโตแกรมแสดงให้เห็นว่าการแสดงออกของ CD2 ลดลงเมื่อใช้เวลาบ่มใน 0.05% trypsinที่นานขึ้น แต่ระดับของการแสดงออกของ CD2 ไม่มีการเปลี่ยนแปลงเมื่อบ่มด้วย TrypLE Express reagent

• มีความเสถียรแม้ว่าจะเก็บในอุณหภูมิห้อง ทำให้คุณไม่จำเป็นจะต้องเก็บผลิตภัณฑ์ในตู้แช่แข็ง นอกจากจะทำให้ประหยัดพื้นที่แช่เย็นแล้วยังหมดปัญหาเรื่อง freeze-thaw cycle อีกด้วย และยังสามารถนำมาใช้ได้โดยไม่ต้องอุ่น (warm) ก่อนใช้งาน
• ผลิตภัณฑ์ถูกผลิตให้อยู่ในระบบ Animal origin–free ทำให้ปราศจากองค์ประกอบที่มาจากสัตว์
• ไม่จำเป็นต้องใช้ Trypsin inhibitor หรือ neutralizer ในการหยุดปฏิกิริยา ใช้เพียงแค่การเจือจางเท่านั้น เช่น ใช้ PBS เพื่อเจือจาง

Gibco™ TrypLE มีผลิตภัณฑ์ให้คุณได้เลือกถึง 2 ชนิด ได้แก่ Gibco™ TrypLE Express และ TrypLE Select โดยทั่งคู่สามารถใช้ได้กับเซลล์เพาะเลี้ยงทั่วไปได้หลากหลายชนิด รวมไปถึงเซลล์ปฐมภูมิ (primary cells) ด้วย

ตาราง 1 แสดงข้อมูลเปรียบเทียบระหว่าง Trypsin, TrypLE Express และ TrypLE Select

สนใจดูข้อมูลเพิ่มเติมได้ที่

https://www.thermofisher.com/th/en/home/life-science/cell-culture/mammalian-cell-culture/reagents/trypsin/tryple-express.html หรือติดต่อแผนก Technical support e-mail: TAS@3nholding.com หรือฝ่ายงาน Life Science product โทร 022748331