แอนติบอดีชนิดทุติยภูมิ หรือ Secondary Antibody นั้นถูกออกแบบมาให้สามารถจับได้กับแอนติบอดีชนิดปฐมภูมิ หรือ Primary Antibody จึงถูกนำมาใช้ร่วมกันเสมอในการวิเคราะห์โปรตีนที่สนใจ เช่น Western Blot, ELISA และ Immunofluorescence โดยที่ Secondary Antibody นั้นมักถูกติดฉลากด้วยสีฟลูออเรสเซนต์ หรือเอนไซม์ เพื่อสามารถติดตามโปรตีนนี้ได้

ถึงแม้ว่า Primary Antibody จะสามารถถูกติดฉลากได้โดยตรงซึ่งไม่จำเป็นต้องใช้ร่วมกับ Secondary Antibody แต่การติดฉลากจะต้องใช้ความเชี่ยวชาญและมีราคาสูง อีกทั้งอาจไปรบกวนบริเวณที่ใช้จดจำแอนติเจนได้ การใช้ร่วมกับ Secondary Antibody จึงเป็นที่นิยมมากกว่าเนื่องจากมีให้เลือกหลากหลายและมีความสะดวกต่อการใช้งาน เช่น สามารถเลือกใช้ Secondary Antibody ที่ติดฉลากด้วยเอนไซม์ Horseradish Peroxidase (HRP) สำหรับงาน Western Blot และติดฉลากด้วยสี Alexa Fluor 488 สำหรับงาน Immunofluorescence โดยใช้ Primary Antibody ตัวเดียวกันได้ เป็นต้น นอกจากนี้ การเลือกใช้ Secondary Antibody ยังช่วยเพิ่มสัญญาณในการติดตามโปรตีน เนื่องจากสามารถเกาะบนแอนติเจนได้มากกว่าการติดตามด้วย Primary Antibody โดยตรง

การเลือกใช้ Secondary Antibody ให้ถูกต้อง มีข้อควรสังเกตุดังนี้

1. Host and target species
2. Targeted reactivity
3. Purification
4. Cross-adsorption
5. Multiplexing
6. Antibody class and subclass
7. Whole antibodies vs. fragments
8. Conjugates
9. Biotin-binding proteins

สนใจสอบถามรายละเอียดเพิ่มเติมได้ที่
https://www.thermofisher.com/th/en/home/life-science/antibodies/secondary-antibodies/secondary-antibody-selection-guide.html หรือ ติดต่อแผนก Technical Support e-mail: TAS@3nholding.com