QuantStudio Absolute Q Digital PCR System

          เทคนิค Digital PCR (dPCR) เป็นเทคนิคในการกระจายปฏิกิริยา และเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรม และนับสารพันธุกรรมที่เกิดขึ้นเมื่อปฏิกิริยาสิ้นสุด (End-point detection) โดยใช้การคำนวณหาปริมาณสารพันธุกรรมโดยไม่ต้องสร้าง Standard curve เมื่อเทียบกับปฏิกิริยา Real-time PCR (qPCR) ซึ่ง dPCR เองสามารถนับปริมาณโมเลกุลที่เป็นบวก จากการถ่ายสัญญาณภาพและนำมาคำนวณเป็นปริมาณของสารพันธุกรรมที่เกิดขึ้น ดังภาพที่ 1

ภาพที่ 1 ความแตกต่างระหว่าง dPCR และ qPCR
ที่มา: https://www.thermofisher.com/th/en/home/life-science/pcr/digital-pcr/quantstudio-absolute-q-system.html

เครื่อง QuantStudio Absolute Q Digital PCR ภายใต้แบรน Applied Biosystems เป็นเครื่อง Digital PCR (dPCR) ที่ใช้เทคโนโลยีของ Microfluidic array plate (MAP) ช่วยในการกระจายอนุภาคของสารพันธุกรรม ตัวเครื่องสามารถทำงานได้ทุกขั้นตอนภายในเครื่องเดียว ตั้งแต่ขั้นตอนการกระจายอนุภาค การเพิ่มจำนวนแบบ Thermal cycling และการแปรผล ซึ่งการเตรียมตัวอย่างสามารถทำได้ง่ายและมีขั้นตอนเหมือนกับการเตรียมปฏิกิริยาของ qPCR โดยมีขั้นตอนหลัก 4 ขั้นตอน ดังภาพที่ 2
1. การเตรียมปฏิกิริยา dPCR
2. ใส่ลงใน MAP 16 plate เพื่อช่วยในการกระจายอนุภาค
3. นำ MAP 16 plate ใส่ลงเครื่อง
 4. วิเคราะห์ผลการทดลอง

ภาพที่ 2 ขั้นตอนการเตรียมและการทำงานของเทคนิค dPCR เครื่อง  QuantStudio Absolute Q Digital PCR
ที่มา: https://www.thermofisher.com/th/en/home/life-science/pcr/digital-pcr/quantstudio-absolute-q-autorun-suite.html

          เครื่อง QuantStudio Absolute Q Digital PCR ตัวเครื่องรองรับการทำงานสูงสุดถึง 4 สี สามารถทำงานทางด้าน Multiplex ได้ถึง 4 target (ภาพที่ 3) ตัวเครื่องใช้เวลาในการเตรียมปฏิกิริยาเพียงแค่ 5 นาที และมีเทคโนโลยีของ Microfluidic array plate (MAP) ที่ช่วยในการกระจายอนุภาคในเพลทที่มีชื่อว่า QuantStudio™ Absolute Q™ MAP16 Plate ทำให้การกระจายอนุภาคคงที่และความสม่ำเสมอในการช่วยกระจายอนุภาคมากกว่า 20,000 micro-reaction นอกจากนั้น MAP ยังช่วยลดปริมาตรคงเหลือที่จะสูญเสีย(Waste volume) จากขั้นตอนการเตรียมปฏิกิริยาไปน้อยกว่า 5% ทำให้มีปริมาตรที่สามารถนำมาวิเคราะห์ผลได้มากถึง 95% ต่อปฏิกิริยาเมื่อเทียบกับ dPCR ยี่ห้ออื่นๆที่เหลือปริมาตรที่นำมาวิเคราะห์ผลเพียง 25–60% และตัวเครื่องใช้เวลาทำปฏิกิริยาเพียงแค่ 90 นาที ในการทำงานจนถึงการเก็บข้อมูลออกมา สามารถดูข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับตัวเครื่องได้ที่ QuantStudio™ Absolute Q™ Digital PCR System

ภาพที่ 3 เครื่อง QuantStudio Absolute Q Digital PCR ภายใต้แบรน Applied Biosystems
ที่มา: https://www.thermofisher.com/th/en/home/life-science/pcr/digital-pcr/quantstudio-absolute-q-autorun-suite.html

ตารางแสดงคุณลักษณะของเครื่อง QuantStudio Absolute Q Digital PCR ภายใต้แบรน Applied Biosystems

ข้อมูลเพิ่มเติม : https://www.thermofisher.com/th/en/home/life-science/pcr/digital-pcr/quantstudio-absolute-q-system.html
หรือติดต่อแผนก Technical support e-mail: TAS@3nholding.com หรือฝ่ายงาน Life Science product โทร 02-274-8331

บทความโดย: คุณธัญวรัตม์ สุคนธา
ตำแหน่ง: Technical Application Specialist