น้ำยา SYBR™ Green qPCR Master Mix

     น้ำยา SYBR™ Green qPCR Master Mix เป็นน้ำยาสำเร็จรูปพร้อมใช้งานที่มีความเข้มข้น 2X ออกแบบมาสำหรับการเพิ่มปริมาณของดีเอ็นเอ (cDNA และ gDNA) โดยใช้วิธี Real-time PCR ที่มีคุณสมบัติพิเศษดังนี้

• เป็นน้ำยาที่รองรับการใช้งานที่หลากหลาย: สามารถใช้กับเครื่อง Real-time PCR ได้หลากหลายรุ่น รวมถึงสามารถใช้ร่วมกับเอนไซม์ Reverse Transcriptase (RT) ในตัวอย่างที่เป็น RNA ได้และสามารถใช้งานได้ทั้งในโหมดมาตรฐาน (Standard mode) และ แบบรวดเร็ว (Fast mode)
• มีความไวและความจำเพาะสูง: สามารถตรวจหา DNA เป้าหมายที่มีปริมาณต่ำๆได้อย่างแม่นยำ ดังผลการทดสอบ

ภาพที่ 1 การทดสอบประสิทธิภาพของน้ำยาโดยใช้ยีน Universal Human Reference (UHR) (ยีน Fibonectin 1) พบว่าชุดน้ำยาให้ผลการทดสอบที่ดีเมื่อทำการทดลองซ้ำ และน้ำยาให้ประสิทธิภาพการทดสอบ 100.9%, R2=0.998

• สามารถตรวจสอบผลได้ในช่วงกว้าง: SYBR™ Green qPCR Master Mix สามารถวัดผลความเข้มข้นของ cDNA ได้ในช่วง 6 logs สำหรับ (ภาพที่ 2)

ภาพที่ 2 การทดสอบ qPCR โดยใช้ UHR cDNA และไพรเมอร์ที่จับกับยีนเป้าหมาย PRTN3 (Proteinase 3 gene) และ FN1 พบว่าน้ำยา SYBR Green qPCR Master Mix พบว่ามีความจำเพาะสูง

คุณสมบัติเพิ่มเติม

• ความเสถียรของน้ำยา: สามารถคงสภาพที่อุณหภูมิห้องได้นาน 72 ชั่วโมงในที่มืด เพื่อป้องกันการเกิดปฏิกิริยาก่อนลงเครื่อง
• ลดการปนเปื้อน: มีการเติมเอนไซม์ Uracil-DNA glycosylase (UDG) และ dUTP ในส่วนผสม เพื่อช่วยป้องกันการเพิ่มจำนวนของ DNA ตกค้างจากการทดลองก่อนหน้า
• ในชุดน้ำยามี ROX (Passive Reference dye): ช่วยในการ Normalize เพื่อป้องกันสัญญาณที่ผิดพลาดในระหว่างการเกิดปฏิกิริยา
• น้ำยาประกอบด้วย dNTP (dUTP / dTTP): ซึ่งมี dUTP (deoxyuridine triphosphate) และ dTTP (deoxythymidine triphosphate) เป็นองค์ประกอบสำคัญ โดยทั้งสองนิวคลีโอไทด์มีบทบาทในการสังเคราะห์ DNA และช่วยควบคุมความถูกต้องของสารพันธุกรรมในเซลล์ ส่งผลให้น้ำยามีความแม่นยำและประสิทธิภาพสูงขึ้น
• น้ำยามีปริมาตร 5 มิลลิตร: สามารถเตรียมปฏิกิริยาได้สูงถึง 500 x 20 µL Reactions ชุดน้ำยาสามารถเตรียมได้ทั้ง 10 (Fast) หรือ 20 (Standard) ไมโครลิตร (ตารางที่ 1)

ตารางที่ 1 การเตรียมปฏิกิริยา SYBR™ Green qPCR Master Mix

ศึกษาข้อมูลเพิ่มเติม: SYBR™ Green qPCR Master Mix
หรือติดต่อแผนก Technical support e-mail: TAS@3nholding.com หรือฝ่ายงาน Life Science product โทร 02-274-8331

บทความโดย: คุณธัญวรัตม์ สุคนธา
ตำแหน่ง: Technical Application Specialist