การวิเคราะห์เซลล์เม็ดเลือดขาวจากตัวอย่าง whole blood โดยไม่ต้องแตกและล้าง (No-Wash-No-Lysed) เซลล์เม็ดเลือดแดง ด้วยเครื่อง Attune™ CytPix™ Flow Cytometer

            การแยกและการตรวจวัดเซลล์เม็ดเลือดขาว (white blood cells: WBC) ในโลหิตรวมของมนุษย์ (human whole blood) โดยวิธีทั่วไปจะต้องทำให้เซลล์เม็ดเลือดแดงที่เป็นองค์ประกอบหลักของ whole blood แตกและทำการล้าง เพื่อลดการรบกวนการตรวจวัดเซลล์เม็ดเลือดขาวอื่นๆ เนื่องจากภายใน whole blood มีเซลล์เม็ดเลือดแดงเป็นองค์ประกอบมากกว่าเม็ดเลือดขาวถึง 1000 เท่า ซึ่งขั้นตอนดังกล่าว เป็นขั้นตอนที่ใช้เวลานานและมักจะมีผลต่อ yield ของเซลล์เม็ดเลือดขาว รวมทั้งเกิดการเปลี่ยนแปลงบางอย่างของเซลล์ที่ได้มาหลังจากผ่านขั้นตอนดังกล่าว

            ในปัจจุบันจึงมีการคิดค้นเทคโนโลยีหรือวิธีที่จะเข้ามาช่วยลดระยะเวลาในการเตรียมตัวอย่าง whole blood สำหรับการวิเคราะห์เซลล์เม็ดเลือดขาวด้วยเทคนิค flow cytometry โดย Attune™ CytPix Flow Cytometer เป็นเครื่อง flow cytometer ที่สามารถเพิ่ม feature พิเศษที่เรียกว่า No-Wash-No-Lyse โดยการใช้ optical filter ที่มีความสามารถเฉพาะในการแยกเซลล์เม็ดเลือดแดงออกจากเซลล์เม็ดเลือดขาวได้ โดยปกติเซลล์เม็ดเลือดแดงจะมีองค์ประกอบของฮีโมโกลบริน ซึ่งเป็นโมเลกุลที่ดูดกลืนแสง violet later ที่ค่าความยาวคลื่น 405 นาโนเมตร ในขณะที่เซลล์เม็ดเลือดขาวไม่สามารถดูดกลืนแสงที่ค่าความยาวคลื่นดังกล่าวได้ จึงสามารถแยกกลุ่มของเซลล์ออกจากกันได้ โดยการแยกช่วงค่าความยาวคลื่นดังกล่าวออกจากกันได้ดี แสดงดังรูปที่ 1

รูปที่ 1 แสดงกลุ่มของ WBC, RBC, PLT และ Noise ที่แยกด้วยการใช้ NWNL filter

          นอกจากนั้นเครื่อง Attune™ CytPix™ Flow Cytometer ยังมีความสามารถในการถ่ายภาพเซลล์ที่มีการวิเคราะห์ผ่านตัวเครื่องได้โดยการเลือกกลุ่มของเซลล์เพื่อคอนเฟิร์มลักษณะ morphology ซึ่งเป็นเทคโนโลยีที่มีประโยชน์อย่างมาก นอกจากนั้นยังมีขั้นตอนในการเตรียมตัวอย่าง ง่ายๆ เพียงแค่การ dilute whole blood กับ PBS หรือ buffer อื่นๆ และวิเคราะห์ตัวอย่างผ่านเครื่อง Attune™ CytPix™ Acoustic Focusing Flow Cytometer แสดงดังรูปที่ 2 และรูปที่ 3

รูปที่ 2 แสดงขั้นตอนการเตรียมตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ด้วยเครื่อง Attune™ CytPix™ Flow Cytometer

รูปที่ 3 แสดงตัวอย่างผลการวิเคราะห์ whole blood ด้วยเครื่อง Attune™ CytPix™ Flow Cytometer

รูปที่ 4 Attune™ No-Wash No-Lyse Filter Kit

Order information:
Attune™ CytPix™ No-Wash No-Lyse Filter Kit /Catalog number A50920

สนใจข้อมูลเพิ่มเติมสามารถติดต่อได้ที่:
https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/A50920?SID=srch-srp-A50920
หรือติดต่อแผนก Technical support e-mail: TAS@3nholding.com หรือฝ่ายงาน Life Science product โทร 02-2748331