ยกระดับขั้นตอน Immunodetection ใน Western Blotting ด้วยเทคโนโลยี SNAP i.d.® 2.0

รูปที่ 1 เครื่อง SNAP i.d.® 2.0 Protein Detection System for Western Blotting

    Western blotting เป็นเทคนิคพื้นฐานที่มีความสำคัญในการตรวจวิเคราะห์หาโปรตีน (Proteomics) โดยเทคนิคนี้ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการตรวจยืนยันการแสดงออกของโปรตีนที่สนใจในตัวอย่าง ไม่ว่าจะเป็นงานวิจัยพื้นฐาน งานพัฒนายา งานวินิจฉัยโรค หรือการควบคุมคุณภาพในห้องปฏิบัติการ

 อย่างไรก็ตามกระบวนการของ Western blotting ประกอบด้วยหลายขั้นตอนและใช้ระยะเวลานาน โดยเฉพาะอย่างยิ่งในขั้นตอนการตรวจจับโปรตีน (Immunodetection) ซึ่งเป็นขั้นตอนที่ใช้เวลาค่อนข้างมาก ซึ่งประกอบด้วย ขั้นตอนการ Blocking, การบ่มเมมเบรนกับ Primary antibody และ Secondary antibody รวมถึงการล้างเมมเบรน (Washing)

รูปที่ 2 การเปรียบเทียบโปรโตคอล Immunodetection แบบดั้งเดิมเปรียบเทียบกับโปรโตคอล 30 นาทีของระบบ SNAP i.d.® 2.0

    โดยทั่วไป ขั้นตอน Immunodetection แบบดั้งเดิม มักต้องอาศัยการใช้เครื่องเขย่า Platform shaker หรือ Rocker เพื่อช่วยให้สารละลายสัมผัสกับผิวเมมเบรนอย่างทั่วถึง ซึ่งกระบวนการทั้งหมดอาจใช้เวลาตั้งแต่ ประมาณ 4 ชั่วโมง ไปจนถึงข้ามคืน (Overnight) นอกจากนี้ ความสม่ำเสมอและความสามารถในการทำซ้ำของผลการทดลองยังขึ้นอยู่กับหลายปัจจัย เช่น ประสบการณ์ของผู้ปฏิบัติงาน ปริมาณสารที่ใช้ และเงื่อนไขการเขย่า ส่งผลให้เกิดความแปรปรวนของผลได้ จากข้อจำกัดดังกล่าว ทาง MerckMilipore จึงคิดค้นนวัตกรรมใหม่ ซึ่งถูกพัฒนาขึ้นเพื่อลดระยะเวลา และเพิ่มประสิทธิภาพช่วยให้ผลการทดลองมีความสม่ำเสมอมากยิ่งขึ้น หนึ่งในนวัตกรรมที่ได้รับความสนใจอย่างมากคือ SNAP i.d.® 2.0 Protein Detection System for Western Blotting

รูปที่ 3 SNAP i.d.® 2.0 ใช้แรงดูดสุญญากาศเพื่อดึงสารต่าง ๆ ผ่านเมมเบรน (ขวา) ต่างจากวิธีดั้งเดิมที่อาศัยการ แพร่ (diffusion) ของสารเพียงอย่างเดียว (ซ้าย)

หลักการการทำงานของระบบ SNAP i.d.® 2.0

    SNAP i.d.® 2.0 ใช้ แรงดูดสุญญากาศ (Vacuum) เพื่อดึงสารต่างๆ ผ่านเมมเบรน ซึ่งต่างจากวิธีดั้งเดิมที่อาศัยการแพร่ (diffusion) ของสารเพียงอย่างเดียว ทำให้การกระจายตัวของสารเป็นแบบสามมิติ (3D distribution) และทำให้ขั้นตอนการบ่มเป็นไปอย่างรวดเร็วมากยิ่งขึ้น

เปรียบเทียบ วิธีดั้งเดิม vs SNAP i.d.® 2.0

ประโยชน์ของเทคโนโลยี SNAP i.d.® 2.0

• ใช้ระบบ Vacuum-driven ช่วยดูดสารต่าง ๆ ผ่านเมมเบรนโดยตรง
• ช่วยให้ Blocking reagent, Antibody และ Wash buffer ซึมผ่านเมมเบรน PVDF หรือ Nitrocellulose ได้อย่างมีประสิทธิภาพ
• ลดการใช้เครื่องเขย่า
• ทำให้ขั้นตอน Immunodetection รวดเร็วขึ้นอย่างมาก
• ลดเวลาจากเดิม 4–24 ชั่วโมง เหลือเพียงประมาณ 30 นาที
• เพิ่มความสะดวกและประสิทธิภาพในการทำงานในห้องปฏิบัติการ

    บริษัท กิบไทย จำกัด เป็น ตัวแทนจำหน่ายอย่างเป็นทางการ ของนวัตกรรมเครื่อง SNAP i.d.® 2.0 ซึ่งเป็นระบบที่ช่วยให้การทำ Western blotting ขั้นตอน Immunodetection เร็วขึ้นอย่างมาก จากเดิมที่ใช้เวลาหลายชั่วโมง เหลือประมาณ 30 นาที โดยใช้หลักการ Vacuum-driven เพื่อดึงสารผ่านเมมเบรนอย่างมีประสิทธิภาพ

ศึกษาข้อมูลเพิ่มเติม: https://www.sigmaaldrich.com/US/en/technical-documents/technical-article/protein-biology/western-blotting/western-blotting-with-snap-id-system
หรือติดต่อแผนก Technical Support e-mail: TAS@3nholding.com
หรือฝ่ายงาน Life Science Product โทร 02-274-8331
ผู้เขียน: ชนิษฐา ไตรรัตน์อภิบาล (Technical Application Specialist for molecular biology products)