Technical Note : ข้อมูลทางเทคนิค

SuperScript® VILO™ cDNA synthesis system

Life Science


ชุดสำหรับสังเคราะห์ cDNA โดยเริ่มตัวจากตัวอย่าง RNA

          SuperScript® VILO™ cDNA synthesis เป็นชุดสำหรับสังเคราะห์ cDNA โดยเริ่มตัวจากตัวอย่าง RNA ซึ่งคำว่า VILO ย่อมาจาก Viriable Input Linear Output ซึ่งหมายถึงการที่สามารถใช้ RNA เริ่มต้นได้ค่อนข้างหลากหลายและช่วงกว้าง (1pg-2.5ug) และ cDNA ที่ได้ให้ค่าที่เป็นเส้นตรงเมื่อนำไปทำกราฟมาตรฐานในงาน qRT-PCR (figure 1) การทำงานจะคล้ายกับการใช้ SuperScript III 1st cDNA synthesis system แต่จะแต่ต่างกันตรงที่ SuperScript® VILO™ cDNA synthesis มาในรูปแบบที่เป็น supermix ที่มีการผสมของส่วนประกอบต่างๆไว้ในหลอดเดียวแล้ว ทั้งนี้ในส่วนของเอนไซม์ SuperScript® VILO™ ยังมีความสามารถในการเพิ่มจำนวน cDNA ได้มากกว่าการใช้ SuperScript III RT ถึง 4 เท่า และสามารถทนอุณหภูมิได้สูงถึง 60oC ทำให้สามารถสร้าง cDNA ได้แม้จะ RNA เริ่มต้นจะมี 2o structure ที่ขดงอ

                    
Figure1: The SuperScript® VILO™ cDNA kit demonstrates the same RT efficiency from low to high input of RNA

ข้อดี 

  • SuperScript® VILO™ cDNA kit มี helper protein ที่จะช่วยทำให้เอนไซม์ทำงานได้ดียิ่งขึ้น และได้ cDNA มากกว่าการใช้ SuperScript III RT มากถึง 4 เท่า
  • เพิ่ม sensitivity ดีมากกว่าการใช้เอนไซม์ตัวอื่นๆ (figure 2)
  • สามารถใช้ RNA ช่วงความเข้มข้นที่กว้างและหลากหลายและให้ผลที่ได้เมื่อนำไปทำงาน qRT-PCR แล้วได้กราฟเป็นเส้นตรง
  • สะดวกต่อการใช้งาน เนื่องจากมีการผสมมาให้แล้วในหลอดเดียวกัน
  • เหมาะกับงาน two-step qRT-PCR หรือต้องการสร้าง cDNA จากปริมาณ RNA น้อยๆ 


 
Figure2: เปรียบเทียบการใช้ชุดสร้าง cDNA ของหลายๆบริษัท แล้วนำไปทำ qPCR
จะพบว่าการใช้ SuperScript® VILO™ cDNA kit ให้ค่า Ct ที่ต่ำ

More Information :  http://www.invitrogen.com

 

X