FAQs: การเลือกใช้ระบบ TaqMan Probe หรือ SYBR Chemistry ในงาน Real-time PCR

          เทคนิค Real-Time PCR หรือ quantitative PCR (qPCR) เป็นเทคนิคที่เราสามารถตรวจวัด PCR products ได้จากสัญญาณการเรืองแสงที่เกิดขึ้นในปฏิกิริยา ซึ่งมีระบบการตรวจวัดที่นิยมใช้กันมีอยู่ 2 วิธี คือ การใช้ SYBR Green–based detection และการใช้ Probe detection (TaqMan Probe)

รูปภาพที่ 1 การเปรียบเทียบการทำงานของ qPCR ของระบบ TaqMan probe และ SYBR Green

          ซึ่งในปัจจุบันการเลือกวิธีการตรวจวัดสำหรับงาน qPCR หลายๆท่านอาจยังมีข้อสงสัยในการเลือกใช้งาน เราจึงได้ทำการรวบรวมคำถามที่พบบ่อยและข้อสงสัยเกี่ยวกับการเลือกใช้ระบบ SYBR Green–based detection และการใช้ Probe detection (TaqMan Probe) มาดังต่อไปนี้

   1) Q: หากต้องการศึกษาที่มีความจำเพาะ (High Specificity) ต่อยีนเป้าหมายสูงควรเลือกใช้ระบบการตรวจสอบแบบใด
        - ควรเลือกใช้ระบบ Probe detection (TaqMan Probe) เนื่องจากสัญญาณฟลูออเรสเซ็นต์ที่เกิดขึ้น เกิดจากการเรืองแสงของ Probe ที่จับจำเพาะต่อยีนเป้าหมายเท่านั้น

   2) Q: หากต้องการศึกษาการแสดงออกของยีน (Gene expression) ควรเลือกใช้ระบบใด
        - ถ้าเป็นการศึกษาการแสดงออกแบบ Low level ควรใช้ระบบ SYBR Green–based detection แต่ถ้าเป็นการแสดงออกแบบ High level ควรใช้ระบบ Probe detection

   3) Q: Applications ใดที่เหมาะกับการตรวจวิเคราะห์ด้วยระบบ SYBR Green–based detection หรือ Probe detection (TaqMan Probe)
        - Applications ที่เหมาะกับการตรวจวิเคราะห์ด้วยระบบ SYBR Green–based detection และ Probe detection (TaqMan Probe) รายละเอียดดังตาราง

ศึกษาข้อมูลเพิ่มเติม: https://www.thermofisher.com/th/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/real-time-pcr-learning-center/real-time-pcr-basics/taqman-vs-sybr-chemistry-real-time-pcr.html
หรือติดต่อแผนก Technical support e-mail: TAS@3nholding.com หรือฝ่ายงาน Life Science product โทร 02-274-8331